Brilliant III Ultra-Fast SYBR Green QPCR Master Mixes [RUO]

Brilliant III Ultra-Fast SYBR Green QPCR Master Mixesシリーズ　(p/n :600882　；600883) は、Taq DNAポリメラーゼに変異を入れて、より高い核酸取り込み速度と、高い特異性さらには、短いディネーチャー時間で高速に活性化できる化学修飾ホットスタートを採用しています（図1Aと1B）。この、改良した化学修飾ホットスタート技術によって、幅広い濃度で検出する特異性と正確性が改善されました。Brilliant III Ultra-Fast SYBR Green QPCR Master Mixesは、特に、増幅しにくい遺伝子や量の少ない遺伝子において非常に高い性能を持っており、より幅広い測定範囲が得られ、感度が改善されました（図2Aと2B）。Brilliant III Ultra-Fast SYBR Green QPCR Master Mixesを使用すると、時間の短縮が可能になり、qPCRの結果を損なうことなくサンプルのスループットが得られます。

Brilliant III Ultra-Fast SYBR Green QPCR Master Mixesシリーズを使用する際には、AffinityScript QPCR cDNA 合成キットを使用すると(p/n; 600559, 詳細はこちら)、幅広い温度範囲で活性を持つAffinityScript逆転写酵素がこの改良したホットスタート技術を活かすので、プライマーダイマーの生成や非特異的なPCR産物を最小限に抑え、最も再現性のある結果をもたらします。

極めて効率的な1-step仕様のQRT PCR キットであるBrilliant III Ultra-Fast SYBR Green QRT PCR Master Mix, 1-Stepシリーズ(p/n; 600886, 600887) では、ファースト・ストランド合成用として至適温度が50℃であるモロニー・マウス白血病ウィルス由来の逆転写酵素を採用することにより最適なパフォーマンスを実現しました。

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図1Aと1B. プライマーダイマーの最小化によって優れた感度を獲得 – ヒトゲノムDNAを50 ngから5 pgまでの5段階希釈したものから、BioRadのCFX96リアルタイムPCRでNumb-1を検出した検量線 (A) 検量線は、Brilliant III Ultra-FAST SYBR Green QPCR Master Mixと他メーカーのMaster Mixを比較するとEfficiencyがほぼ同じです。しかし、解離曲線 (B)は、Brilliant III Ultra-FAST SYBR Green QPCR Master Mix以外の他社すべてのMaster Mixにおいて、プライマーダイマーや非特異的なPCR副産物の生成を示しています。T社はCtが早いですが、Efficiencyは目的産物と競合する副産物の生成によって値に狂いが生じています。Brilliant III Ultra-FAST SYBR Green QPCR Master Mixから副産物が生成しないことは、改良したホットスタート技術が非特異的な副産物生成を妨げ、遺伝子発現解析での信頼性を大いに高めます。

図2B. 解離曲線は、他社すべてのMaster Mixにおいて、プライマーダイマーや非特異的なPCR副産物生成を示しています。A社とI社はCtが早いですが、目的産物の増幅と競合して副産物が生成することで、反応の効率が損なわれ、検出限界と測定範囲が減少しています。Brilliant III Ultra-FAST SYBR Green QPCR Master Mix のTaqへの変異と新たなホットスタート技術は、広範囲にわたるアッセイのバリデーションを減らし、様々なアッセイにおいて一定で信頼性のあるデータを提供します。

図2A. プライマーダイマーの最小化によって優れた感度を獲得 – Brilliant III Ultra-FAST SYBR Green QPCR Master Mixは、非特異的な副産物の生成を妨げ、qPCRの結果において非常に高い信頼性を提供します。検量線は、ヒトゲノムDNAを50 ngから5 pgまでを10倍で5段階希釈したものから、ABIのStepOnePlusリアルタイムPCRでNumb-1を検出したものになります。

ORDERING INFORMATION

Product	Catalog #	Amount	Price
Brilliant III Ultra-Fast SYBR  Green QPCR Master Mix　　 600882 400 rxns お問い合わせください Call Designed for researchers who want access to their data faster without compromising data quality. 2X master mix with ROX provided in a separate tube 分析保証書 (C of A)　　 マニュアル
Brilliant III Ultra-Fast SYBR Green QPCR Master Mix, 10 pack　 600883 4000 rxns お問い合わせください Call Designed for researchers who want access to their data faster without compromising data quality. 2X master mix with ROX provided in a separate tube 分析保証書 (C of A)
Brilliant Ⅲ Ultra-Fast SYBR® Green QPCR Master Mix SYBR® 用 ROX Plus （ROX混合済み、高濃度） 600889 400 rxn お問い合わせください Call 分析保証書 (C of A)　　 マニュアル
Brilliant Ⅲ Ultra-Fast SYBR® Green QPCR Master Mix SYBR® 用 ROX Plus（ROX混合済み、低濃度） 600892 400 rxn お問い合わせください Call 分析保証書 (C of A)　　 マニュアル
Brilliant III Ultra-Fast SYBR Green QRT PCR Master Mix, 1-Step 600886 400 rxns お問い合わせください Call Designed for researchers who want access to their data faster without compromising data quality. 2 modules: RT module (containing MMLV Reverse Transcriptase and RNase Block) and a 2X qPCR master mix with ROX in a separate tube 分析保証書 (C of A)　　 マニュアル
Brilliant III Ultra-Fast SYBR Green QRT PCR Master Mix, 1-Step, 10 pack 600887 4000 rxns お問い合わせください Call Designed for researchers who want access to their data faster without compromising data quality. 2 modules: RT module (containing MMLV Reverse Transcriptase and RNase Block) and a 2X qPCR master mix with ROX in a separate tub 分析保証書 (C of A)