Protein Expression Competent Cell Pack
掲載の製品はすべて試験研究用です。診断目的にご利用いただくことはできません。
大腸菌でのタンパク質発現を最適化する場合には、アジレント(旧ストラタジーン)のProtein Expression Competent Cell Packがお勧めです。BL21株由来の独自のタンパク質発現用大腸菌株が4種類セットになっていますので、さまざまな問題を克服し、より高レベルでのタンパク質発現が経済的に実現できます。
アジレント(旧ストラタジーン)のBL21-CodonPlus-RIPL Competent Cellsは大腸菌では使用頻度の低い4種類のコドン(R, I, P, L)すべてを補うプラスミドが組み込まれており、ATリッチなゲノム、GCリッチなゲノムの双方に対応可能で幅広く真核生物の遺伝子を発現することができます。
誘導をかけない状態でもT7 RNAポリメラーゼの基底レベルの活性があるため、タンパク質は少量発現しますが、ホストの大腸菌に対して毒性を発揮するタンパク質がコードされている場合にこの基底レベルの発現が問題となります。アジレント(旧ストラタジーン)のBL21-Gold(DE3)pLysS株では、T7 lysozymeを低レベルで発現されることでT7 RNAポリメラーゼの活性を阻害して基底レベルでのタンパク質発現を抑制します。IPTGで誘導をかけた際には、T7 RNAポリメラーゼの発現がT7 lysozymeに比べて圧倒的に多くなるため抑制は解除され、目的タンパク質が発現します。
BL21-Gold 細胞はクローニングおよびタンパク質発現の両方に理想的な大腸菌株です。BL21-Gold株は EndA1 ヌクレアーゼを欠損しているので、高品質なプラスミドDNAを精製することができます。また、BL21-Goldは Hte 表現型を持ち、親株のBL21菌株と比べて100倍以上もの形質転換効率があります。BL21-Goldに直接クローニングすることにより、他の菌株でクローニングしたのちに発現用の菌株にサブクローニングという従来の方法に比べて二日間も時間を節約することができます。endA (-) 遺伝子型と高い形質転換効率で、BL21-Gold 株は遺伝子のクローニング・発現コンストラクト構築、組み換えタンパク質発現のプロセスを大幅に加速します。
アジレント(旧ストラタジーン)のすべてのBL21由来株は、OmpTプロテアーゼ、Lonプロテアーゼを欠いているので、組換えタンパク質が分解されることなくintactで精製することができます。また、BL21由来株は、ほとんどの大腸菌用発現ベクターを使用することができます。BL21(DE3)株は、Variflex protein expression systems などのT7プロモーターを搭載した発現ベクターでのタンパク質の発現にしようできます。
これらすべての株は、Lonプロテアーゼ、OmpTプロテアーゼをもともと欠損し一般的にタンパク質発現に用いられるE. coli Bに由来します。Dcm methylaseはE. coli B株では欠損していますが、上記菌株ではゲノムに挿入されています。*Streptomycinに対しては75 mg/ml以上の濃度では感受性があります。
Codon usage:
Purchase of this product is accompanied by a limited use license to use the product as a reagent for research purposes. If Purchaser intends to use the product outside the scope of the license, he needs to enter into a License Agreement with F. Hoffmann-La Roche Ltd, Grenzacherstrasse 124, 4070 Basel, Switzerland or Hoffmann-La Roche Inc.
The T7 expression system is based on technology developed at Brookhaven National Laboratory under contract with the U.S. Department of Energy and is protected by U.S. patents assigned to Brookhaven Science Associates (BSA). BSA will grant a nonexclusive license for use of this technology, including the enclosed materials, based on the following assurances:
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The DNA sequences encoding for cold-adapted chaperone proteins or variants thereof, are proprietary or exclusively licensed to Agilent and licensed hereunder for research purposes only. Licensee may modify only the non-coding region outside of the nucleic acid encoding the cold-adapted chaperone proteins of the Products to facilitate non-commercial research. Licensee shall not have any rights to (i) modify the coding region of the nucleic acid encoding the cold-adapted chaperone proteins of the Products, (ii) offer the Products, or any component, derivative or modification thereof, for resale, or (iii) distribute, transfer, or otherwise provide access to, the Products, or any component, derivative or modification thereof, to any third party for any purpose or use.Product | Catalog # | Amount | Price | |||||||||||||||||||||
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