非小細胞性肺癌におけるMETH-2遺伝子のプロモーター領域メチル化と発現抑制の検出

Pub.No. 5989-3514EN

Measuring the METH-2 promoter hypermethylation and transcript downregulation in non-small cell lung carcinomas with the Agilent 2100 bioanalyzer (非小細胞性肺癌におけるMETH-2遺伝子のプロモーター領域メチル化と発現抑制の検出)

抗血管新生に関わるといわれている METH-2 (ADAMTS-8) について、肺組織 （非小細胞性肺癌 NSCLC ・正常） から抽出した RNA をもとに RT-PCR （comparative multiplex PCR） を行い遺伝子発現を確認した。また、METH-2 遺伝子での欠損を PCR法により、intron 中の SNP (rs1552330) の有無を PCR/制限酵素処理（RFLP） により解析した。さらにDNA メチル化を bisulphite 修飾と PCR 法を使用して解析した。その結果、NSCLC (扁平上皮癌 adenocarcinoma ADC ・腺癌 squamous cell carcinoma SCC） では METH-2 の発現抑制が確認された(23 試料中 23）。METH-2 プロモータ領域におけるメチル化 （hypermethylation） は正常組織に比べると NSCLC で高頻度に確認された。homozygous deletion (両方の染色体で欠損すること） は確認されず、また rs152330 の SNP は 23 サンプルのうち 9 heterozygous、14 homozygous であり、heterozugous のうち microsatellites のアレル不均衡 （allelic imbarance) は 44% であった。

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